影響電泳加工度的要素

電泳加工

1、電滲效果

在支持物的電泳中，影響電泳的另一個重要要素是電滲效果。所謂電滲就是指在電場中液體對固體支持物的相對移動，

例如在pH8.6時，血清蛋白質進行紙電泳時，γ球蛋白與其他蛋白質相同帶負電荷，應該向正極移動，但是它卻向負極方向移動，

這就是電滲效果的效果。濾紙的纖維間具有很多孔隙帶有負電荷，如一束毛細管，進行電泳時蛋白質通過這些孔隙向前移動。

紙的孔隙帶有負電荷，與帶電顆粒相同能夠招引正離子，因而介質沿管壁相對地帶的較多的正電荷。在電場中，

帶負電荷的蛋白質向正極移動，而介質卻向反向陰極移動，從而對蛋白質顆粒的電泳加工起阻遏效果。

因為γ球蛋白分子顆粒大，凈電荷較少，移動速度慢，電滲效果大于顆粒向前電泳加工的力，效果γ球蛋白向撤退。

而其他血清蛋白質，因分子較小，凈電荷較多，電滲效果小于分子向前移動的力，

因而分子向前移。所以，血清蛋白質電泳后球蛋白反而在點樣方位之后。

2、溶液的pH值

溶液的pH值挑選了帶電顆粒解離的程度，也挑選了物質所帶凈電荷的多少，關于蛋白質，氨基酸等兩性電解質而言，

溶液pH值離電點越遠，顆粒所帶凈電荷越多;電泳速度越快;反之則越慢。例如血清中幾種首要蛋白質的等電點各不相同，

白蛋白等電點是4.0。α2球蛋白等電點是5.06，β球蛋白等電點是5.1，γ球蛋白等電點是7.1。當在pH8.6的電泳緩沖液中電泳時，

這些蛋白質都帶負電荷，它們的電泳加工速度是白蛋白< α2球蛋白>β球蛋白>γ球蛋白。因而，當要別離一種蛋白質混合物時，

應挑選一種能擴展各種蛋白質所帶電荷量差異的pH值，以利于各種蛋白質分子的解離。一起，為堅持電泳過程中溶液pH穩(wěn)定也須運用緩沖液。

3、溶液的離子強度

溶液的離子強度是另一個重要挑選的條件，在堅持滿足緩沖能力前提下，離子強度要最小。溶液的離子強度越高，

帶電顆粒電泳加工速度越慢，反之越快。濃度大的緩沖液在合適電壓下，有較低的電阻和較大的電流，產熱較高。

假設這種額定的熱能夠遣散，高濃度的緩沖液松散常數(shù)較低，能夠產生較窄細的電泳區(qū)帶。

離子強度很高時要用低電壓，防止過多產熱，這樣又導致長的電泳時間，致使增加變性和區(qū)帶別離困難。